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方案242 冻存活检组织实验
发布时间:2021-09-29

  通常难以利用较大的活检标本和由其提供的一切有价值的材料。在这些情况下,可通过冷冻保存组织。 来源:动物细胞培养:基础技术指南第五版

  二、操作步骤1.  除去坏死组织、脂肪和纤维组织后,将肿瘤切成约 1~2 mm 的小块。同原代培养,将肿瘤块放入 DBBS 中浸洗。

  3.  将 1 ml 含有 10%DMSO 的生长培养液加入到放有肿瘤块的冻存管中,在室温下放置 30 min。

  4.  将冻存管按 1°C/min 冷冻(见方案 20.1),然后将冻存管移入液氮罐。为了避免爆炸危险,不要将冻存管浸入液氮。

  5.  将冻存管放在 37°C 温水中,使其融化(要有适当的预防措施,见方案 20.2)。

  7.  缓慢补充不含 DMSO 的新鲜培养液,轻轻摇动混合后,放置 5 min。

  8.  用不含 DMSO 的培养液逐渐置换全部的培养液,然后将肿瘤块移入 Petri 培养皿,按常规原代培养方法进行操作,但每培养瓶中放入两倍多细胞。

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